根據(jù)葉綠體色素提取液對可見光譜的吸收，利用分光光度計在某一特定波長測定其吸光度，即可用公式計算出提取液中各色素的含量。根據(jù)朗伯-比爾定律，某有色溶液的吸光度A與其中溶質濃度C和液層厚度L成正比，即

　　A＝αCL

式中：α比例常數(shù)。當溶液濃度以百分濃度為單位，液層厚度為1cm時，α為該物質的吸光系數(shù)。各種有色物質溶液在不同波長下的吸光系數(shù)可通過測定已知濃度的純物質在不同波長下的吸光度而求得。如果溶液中有數(shù)種吸光物質，則此混合液在某一波長下的總吸光度等于各組分在相應波長下吸光度的總和。這就是吸光度的加和性。今欲測定葉綠體色素混合提取液中葉綠素a、b和類胡蘿卜素的含量，只需測定該提取液在三個特定波長下的吸光度A，并根據(jù)葉綠素a、b及類胡蘿卜素在該波長下的吸光系數(shù)即可求出其濃度。在測定葉綠素a、b時為了排除類胡蘿卜素的干擾，所用單色光的波長選擇葉綠素在紅光區(qū)的最大吸收峰。