酶標分析儀操作注意事項有哪些?酶標分析儀常見故障列舉!
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一、酶標分析儀
酶標儀廣泛地應用在臨床檢驗、生物學研究、農(nóng)業(yè)科學、食品和環(huán)境科學中,例如低紫外區(qū)的DNA、RNA定量及純度分析(A260/A280)和蛋白定量,酶活、酶動力學檢測,酶聯(lián)免疫測定(ELISAs),細胞增殖與毒性分析,細胞凋亡檢測(MTT),報告基因檢測及G蛋白偶聯(lián)受體分析(GPCR)等。特別在近幾年中,由于大量的酶聯(lián)免疫檢測試劑盒的應用,使得酶標儀在生殖保健領域中應用越來越廣泛,同時促進了生殖健康技術(shù)水平提高。
酶標分析儀相關(guān)概念包括:
1. 微孔板。是一種經(jīng)事先包埋專用于放置待測樣本的透明塑料板,板上有多排大小均勻一致的小孔,孔內(nèi)都包埋著相應的抗原或抗體,微孔板上每個小孔可盛放零點幾毫升的溶液。
2. 中心定位。儀器會自動對酶標孔進行中心定位,中心定位是要消除酶標孔底的凸凹引起的厚薄不均帶來檢測的不準確。在對每一個酶標儀進行檢測時,儀器其實要進行35個點的測量,選取最中間的5個點的均值為本孔的OD(optical density)值。
3. 光源的參照通道。參照通道是用來校準由于電壓不穩(wěn)或燈泡磨損帶來的影響。
4. 質(zhì)量控制。質(zhì)量控制是試劑檢測的重要因素。請按照試劑說明書的要求進行質(zhì)量控制。
5. 空白校正。有一些試劑盒的說明書將空白孔設置為空氣,其它大多數(shù)空白孔的設置是用試劑來設置的,請按照試劑盒的說明書要求進行。
二、酶標分析儀操作注意事項
酶標儀的功能是用來讀取酶聯(lián)免疫試劑盒的反應結(jié)果,因此要得到準確結(jié)果,試劑盒的使用必須規(guī)范。許多醫(yī)院在使用酶標儀之前是通過目測判斷結(jié)果,操作過程隨意性較大,在使用酶標儀后如果不能及時糾正操作習慣,會造成較大誤差。在酶標儀的操作中應注意以下事項:
1. 使用加液器加液,加液頭不能混用。
2. 洗板要洗干凈。如果條件允許,使用洗板機洗板,避免交叉污染。
3. 嚴格按照試劑盒的說明書操作,反應時間準確。
4. 在測量過程中,請勿碰酶標板,以防酶標板傳送時擠傷操作人員的手。
5. 請勿將樣品或試劑灑到儀器表面或內(nèi)部,操作完成后請洗手。
6. 如果使用的樣品或試劑具有污染性、毒性和生物學危害,請嚴格按照試劑盒的操作說明,以防對操作人員造成損害。
7. 如果儀器接觸過污染性或傳染性物品,請進行清洗和消毒。
8. 不要在測量過程中關(guān)閉電源。
9. 對于因試劑盒問題造成的測量結(jié)果的偏差,應根據(jù)實際情況及時修改參數(shù),以達到最佳效果。
10. 使用后蓋好防塵罩。
11. 出現(xiàn)技術(shù)故障時應及時與廠家聯(lián)系,切勿擅自拆卸。
三、酶標分析儀常見故障
故障一:開機后無反應。應檢查電源線是否接好,保險絲是否燒斷。
故障二:原始吸光度多為負值。應檢查空白孔的吸光度值是否太高,酶標儀打印出的原始吸光度值是減去空白以后的,如空白太高則可能出現(xiàn)負值。
故障三:酶標儀在使用定量功能時,曲線出現(xiàn)異常形態(tài)??赡芸蛻羰褂昧司€性/對數(shù)的曲線模式,同時使用了濃度為0的標準物,導致機器無法對0取對數(shù),從而形成了異常的曲線形態(tài)。
故障四:在做定量測定時,打印報告中的濃度值出現(xiàn)****,提示超出曲線范圍。標準的吸光度過高可能導致曲線的上移,使許多低吸光度值的樣本無法打印在報告上,可以通過稀釋標準樣本使曲線下移,從而解決上述的問題。
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