電子顯微鏡的新貴智能電鏡初出茅廬 它的作用是什么
新型工業(yè)掃描電鏡受到越來越多的重視,高分辨率數據有海量需求,特別是材料和生物醫(yī)學領域。 然而長期以來,電鏡的潛在問題---用戶使用操作繁雜的問題尚未解開,一定程度上影響了儀器的普及推廣。
本文介紹工業(yè)掃描電鏡的新貴——智能電鏡。著重描述其多重的自動化功能。智能目的是讓電鏡成為科研和工程上得心應手的利器,發(fā)揮工具的作用。
新年伊始,國產新型掃描電鏡如黑馬騰空而起,超高速性能達到前所未聞的新高度。掃描電鏡成像速率實現雙通道100M像素/秒。即代表表面形貌的二次電子(SE)和代表成分信息的背散射電子(BSE)同步成像,達到2x100M像素/秒。以單通道舉例而言,產生某一幅可辨認的生物組織BSE模式圖像約花260ms。 同樣條件下,國外某知名品牌同檔機型需花26000ms,國產掃描電鏡成像速度快了一百倍。
2x200幀/秒@512x512的高速攝像能力, 或2x60幀/秒@1024x1024即兩倍于視頻高清成像,可實現捕捉動態(tài)過程。在1.2秒內雙通道大范圍高清成像,對觀測一覽無遺。電鏡一天可自動采集產生2 至 8TB數據量。方便地構建全景“地圖”集,沒有懸念。超微結構的三維重構成為可能。
快速生成清晰圖像是掃描電鏡的精髓。在最佳工作距離條件下, 新型電鏡分辨率可達1.0nm@10kV或 1.5nm@1kV。隨之而來的是老問題:如何方便地調試操作和維護電鏡? 這便是智能電鏡的由來。
什么是智能電鏡?開發(fā)智能電鏡的初衷是突破傳統(tǒng)觀念,打消使用誤區(qū),提供簡便環(huán)境,實現無人操作。智能電鏡功能模塊示意圖如圖一所示。具體而言,不妨用“五個自動”功能來概括, 即自動巡檢、自動進料、自動對中、自動對焦、自動操作。
圖一 智能電鏡功能模塊示意圖
一.自動巡檢工業(yè)掃描電鏡的電子光學系統(tǒng)主要由電子槍、電磁透鏡、掃描線圈組成。電子束由電子源發(fā)出,熱場發(fā)射電子槍保證有足夠的初始電子發(fā)射到樣品上。加速電壓設在0.1 - 12kV范圍。加速電壓越高,電子速度越快,焦距就越長,景深也越大。
電磁透鏡的磁場作用力不改變電子運動的速度,只改變電子運動方向。高速的靜電偏轉器置于物鏡內,不僅結構緊湊,而且保證大掃描場觀察時邊緣的象差較小,以達到圖像高分辨率。 偏轉器控制光束聚焦在樣品上快速掃描。探測器收集二次電子和背散射電子等信號。經過放大后進行數據處理,便可得到電子圖像信息。
電鏡系統(tǒng)開機自檢。巡查之后隨即進入工作狀態(tài)。一反以往從上至下反復調整的過程。電鏡觀察前光學導航模塊會自動地定位、尋地和導航,免去耗費大量人工在鏡前尋找觀察區(qū)域,將工程人員從繁鎖的調試中解放出來。系統(tǒng)內置定期全面自檢,將電子光學系統(tǒng)調節(jié)到連續(xù)運作最佳狀態(tài)。
自動巡檢離不開支撐系統(tǒng)的穩(wěn)定體系。發(fā)射源的穩(wěn)定起著首要作用。 一周發(fā)射電流波動 一周發(fā)射電流波動《1%,保障了基本性能。
二.自動進料制備技術與電鏡緊密配合,大量的樣本在電鏡中連續(xù)觀察,是提高工作效率的關鍵之一。 以生物樣品為例,要觀察的生物樣本塊要經過環(huán)氧包埋等樣品處理,使其變硬好切,之后在切片機上被切成幾十納米的薄片。切后的薄片落入收集水槽中被傳送帶捕獲,順次以條帶排列被收集在圓硅片上面。圓硅片上可以平整的收集幾十片乃至上百片樣品,然后承載樣品傳送入電鏡樣品臺,一次性進行大量樣本的觀察。
10余厘米邊長的見方樣品臺沿著X軸和Y軸精密導軌行程自由位移。樣品重復定位精度達200nm。這就避免了每次重調位置的必要性。
電鏡成像要實現全自動化,還需要制備技術同步跟上。制備與電鏡的無縫銜接,樣品直接切片收集,必要時可采用條帶或卷盤機方式自動傳送進入電鏡。